CRISPR新技術!神奇的「剪刀」:可用於任何細胞類型
日前,發表在Development 上題為「Optimized inducible shRNA and CRISPR/Cas9 platforms for in vitro studies of human development using hPSCs」的一項研究中,Wellcome Trust Sanger 研究所和劍橋大學的科學家們創造了一種更高效、可控的CRISPR基因組編輯平台——sOPTiKO。
研究證實,這一單步系統(single-step system)能夠在機體的每一種細胞以及發育的每一個階段中發揮作用。這一新方法有望幫助推動發育生物學、組織再生以及癌症領域的研究。
事實上,研究人員開發了兩種互補的方法。sOPiTKO是一種敲除系統,能夠通過破壞DNA關閉基因。sOPTiKD是一種敲低系統,能夠通過干擾RNA使基因的作用「沉默」。使用這兩種方法,科學家們能夠在細胞發育任何階段的任何細胞類型中關閉和沉默基因。
此外,新方法還能夠讓科學家們一次沉默不止一個基因的活性。因此,研究人員有望藉助這一技術調查相關基因整個家族的作用。
sOPTiKO高度靈活,可用於機體的任何組織,且無需每次創建一個新系統。sOPiTKD則大大提高了實驗效率。此前,想要沉默3個基因的活性,研究人員需要一個個敲低,但現在可以一步實現了。9個月的過程縮短到了1-2個月。
領導該研究的Ludovic Vallier教授說:「隨著細胞從幹細胞發育成完全分化的成熟細胞,細胞所含的基因承擔了不同的角色。之前,如果我們敲除一個基因,我們只能在第一步觀察到這將帶來怎樣的影響。現在,藉助sOPTiKO在較後的發育階段敲除基因,我們能夠調查基因在相應發育階段的作用。」
參考資料:
Sciencedaily:Enhanced CRISPR lets scientists explore all steps of health and disease in every cell type
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