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實驗室外對話韓春雨:公布所有數據不就等於韓寒公布手稿嗎?

韓春雨瘦了,一位接近他的人說,最近韓春雨經常做實驗到凌晨兩三點鐘。


他的實驗室在河北科技大學一座四層老樓里,紅色的外牆伏滿了爬牆虎,韓春雨在這一待就是10年。今年5月2日,一篇關於新基因編輯技術NgAgo的論文在國際頂級期刊《自然·生物技術》(Nature Biotechnology)在線發表(後在該刊第34冊7月號紙質版發表),作者是河北科技大學副教授韓春雨領銜的課題組。發表後,不僅他個人,連他所在的實驗室,都獲得了前所未有的關注。為了安全,學校不得不給實驗樓安裝上刷卡入內的智能門,還布了攝像頭。

實驗室外對話韓春雨:公布所有數據不就等於韓寒公布手稿嗎?


韓春雨實驗室所在的四層老樓新安裝上智能門。


韓春雨有兩間研究室在三樓走廊的盡頭。在接待過一波又一波記者,甚至有長江學者來訪的房間里,一張白色紙片嵌在插座縫裡,上面寫著「Arrival of the Argonautes 1.0T and 2.0 Smart! (Ago1.0T和2.0Smart版本的到來!)」,後綴為兩個笑臉。實驗室在等NgAgo優化版2.0儘快問世。

實驗室外對話韓春雨:公布所有數據不就等於韓寒公布手稿嗎?


但NgAgo1.0仍然搖搖欲墜。由於多個實驗室無法重複實驗,被認為可以超越時興的CRISPR-Cas9,幫助人類對目標基因進行「編輯」的NgAgo技術遭到質疑。多國科學家呼籲《自然·生物技術》雜誌督促韓春雨公開所有實驗數據。8月2日,《自然?生物技術》發言人回復媒體稱,「將按照既定流程來調查此事。」


在河北科技大學默默無聞坐了10年冷板凳,沒有發表任何重要論文之後,NgAgo的發現把韓春雨拉進聚光燈下。論文發表的3個月內,韓春雨的角色來了個急轉彎,從「網紅科學家」變成了質疑者口中可能的「論文造假者」。


韓春雨的父親是河北師範大學教授,哥哥韓田鹿是河北大學教授,上過《百家講壇》。


《自然》雜誌在一篇報道中是這麼形容韓春雨和他現在的處境的:一位隱士般的科學家,「面對甚囂塵上的爭議,依然堅持著他的主張。」

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韓春雨有兩間研究室在三樓走廊的盡頭。


實驗無法重複「80%歸咎於實驗被污染」


質疑韓春雨和質疑NgAgo,幾乎可以划上等號。

NgAgo是「Natronobacterium gregoryi Argonaute」的簡稱,也就是來自格氏嗜鹽鹼桿菌的核酸內切酶。它足夠特別,因為不同於Argonaute(Ago)家族諸多需要高溫的酶,NgAgo能在37攝氏度常溫下進行操作。這使得它能夠撼動當今最為時興的「基因魔剪」CRISPR-CAS9,共同效力於「編輯」目標基因,實現對特定DNA片段的敲除、加入等。


但很快,被捧為「諾獎級」科學新星的韓春雨受挫了。


起初,6月,在留學生論壇mitbbs和Google專門討論NgAgo的小組中,有人表示無法重複韓春雨論文中的實驗,激起漣漪。


重複實驗是證實一個科學結論最簡單的方法。如果同行在同樣條件下得到相同結果,這個結論可以認為是被初步證實了。

方舟子的出現讓小圈子裡「無法重複」的議論擺到大眾面前。7月2日,方舟子發文稱,收到若干實驗室的來信,表示無法重複NgAgo實驗中的圖4(被認為是關鍵的實驗環節),要求韓春雨公布已經重複成功的實驗室及實驗細節。當日,韓春雨在百度貼吧做出回應,提醒實驗避免污染和具體操作的注意事項,自此之後,韓春雨一度緘口。7月中旬,方舟子又連發兩文,懷疑韓春雨論文的圖4有PS痕迹,將質疑的矛頭指向造假。

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韓春雨論文中的關鍵實驗環節。


質疑聲的高潮隨著澳大利亞國立大學基因學家蓋坦·布爾焦(Gaetan Burgio)的倒戈而到來。布爾焦在7月15日讚許過NgAgo,但到了29日,實驗的進一步結果出來後,布爾焦表示並無嚴格意義上的證據顯示韓春雨的NgAgo技術有基因編輯的跡象,並且要求韓春雨公開所有原始數據和實驗條件。此舉得到了西班牙、美國科學家的響應。直至8月2日,《自然?生物技術》發言人表示「認真對待」、「慎重考慮」、 「將按照既定流程來調查此事」。


《自然》雜誌8月8日的報道顯示,韓春雨在接受採訪時表示,他在實驗中發現,只有在他們實驗室培養的細胞中運用NgAgo系統才有效,在買來的細胞中無法重複成功。後來,韓春雨發現重複失敗,可能出在購買的實驗用細胞受到了支原體污染。他認為,很多其他的實驗是直接由研究生操作,他們做實驗時可能太快,忽略了一些受到污染的試劑。


但這個解釋並沒有被Jan Winter認可。Jan Winter是來自德國癌症研究中心的博士生,沒能重複成功。對於韓春雨「重複實驗失敗是因為細胞污染」的解釋,Jan Winter認為:「這不是科學家無法重複實驗的問題所在」。


但在8月10日,韓春雨在接受採訪時變得更為嚴謹:「其他科學家無法重複的原因,我們也在研究。但必須要作出科學的結論來才行,不能隨口一說。比如用污染的細胞和不污染的細胞對比,以及這些污染到底是什麼。」


公布更多實驗細節等於「韓寒公布手稿」?


面對所有質疑,韓春雨自信,並近乎執拗地相信,他只需要按照科學的流程去回應目前所有的質疑,而不需要通過媒體發聲。儘管目前質疑聲來勢兇猛,他仍覺得質疑他的科學家沒有採用科學的方式。


韓春雨認為,唯一正規的學術質疑方式,是質疑者把實驗過程和數據寫成論文投稿給《自然·生物技術》,期刊接收了,轉給原作者,原作者才會做出回應,以更多的實驗過程和數據應對質疑。


8月2日上午,當有媒體報道《自然·生物技術》發言人「將按照既定流程來調查此事」的聲明時,韓春雨正在實驗室里。韓春雨說,他收到了來自期刊的郵件,內容和媒體公布的一樣。


對於郵件中摘取的關於公開數據的規定,韓春雨說:「這是他們網站上自帶的,原來我投稿的時候就有,是發論文的前提要求。已經做到了,提供過了。」


美國約翰?霍普金斯大學工學院董事,曾擔任Computational Linguistics雜誌評委以及許多國際學術會議程序委員會委員、聯執主席的吳軍則認為,方便同行證實自己的科研成果是科學家的責任,最基本的是在論文中寫清實驗怎麼做,如受論文篇幅限制,那麼科學家有義務為同行答疑,私下告訴實驗細節。


韓春雨覺得自己是坦誠的,之前有同行因為無法重複,曾列出實驗細節來詢問如何改進,「真誠寫郵件的人,我們一看就知道是認真做實驗的,我們一定會給他很好的解釋,然後告訴他哪些需要注意。」韓春雨透露,也有實驗室跑來當面詢問實驗細節,還直接待在韓春雨所在的實驗樓進行重複實驗。


實驗細節很關鍵。各項參數、細節都得一致,稍有出入,就不能稱為嚴格意義上的重複實驗。韓春雨指著桌上兩隻底紋不同的功夫茶杯,反問道:「一樣嗎?外行人遠看覺得是一樣。」


當記者詢問公開更多數據是否有利於重複實驗的開展時,韓春雨的回答是否定的:「公布也沒用,那不等於韓寒公布手稿嗎?」


但據8月8日《自然》雜誌的報道,應Addgene的要求,在8月8日,韓春雨已經向Addgene提交了詳細的protocol(實驗細節),並希望這可以幫助其他科學家儘快重複出結果。Addgene是一家全球科學家質粒共享的非盈利組織。6月,韓春雨曾將實驗所需的質粒上傳到Addgene,以便科學家進行NgAgo重複實驗。


8月9日,更新版的實驗細節已可在Addgene網站下載。韓春雨接受媒體採訪時表示,該版本與原先的實驗操作「原則上沒有本質區別」,是他最近和其他一些研究者交流後,總結了可能被研究者忽視的「特別需要注意的事項」。


據比對,新的實驗步驟有幾處更改,其中包括「血清品牌由 Hyclone 變更為 Gibco」,「293T細胞貼壁不牢,換液時要小心操作」,「溶解和稀釋質粒及 gDNA 的緩衝液變更為水(pH 8.0)」,「建議在質粒/gDNA共轉染的8小時、12小時或24小時後,補轉一次gDNA(舊版方法中只提及了『24小時』)」等內容。


Jan Winter說自己將完全按照更新的實驗細節,再做一次實驗。澳大利亞國立大學蓋坦·布爾焦則認為,該版本相較於論文中已提供的實驗數據,沒有增加太多內容。一位不願具名的學者評論說:「不認為這有多大幫助。沒有什麼特別的。」


8月10日下午,《自然》雜誌工作人員回復媒體稱,韓春雨未將該版本實驗細節提交給《自然》,暫無可以對外公開的調查進展。


國家下撥300萬元專項研究資金


在多種場合下,韓春雨承認的一點是,NgAgo現在還不穩定,需要優化改善。但他不能等到技術優化了之後再發表論文,「這是科學發現,競爭非常厲害。」他舉例說CRISPR在剛問世時,效率也不到1%,都是慢慢改進的過程。


但外界沒有太大耐心,從6月開始,無法重複NgAgo實驗的反饋越來越多。


韓春雨反而覺得在論文發表後1個月就出現質疑聲,這不科學。他說:「如果他們確定是假的,根本不用炒作,過段時間做不出來,到時候《Nature》要求撤稿,它也就不為所動了。為什麼要這麼迫不及待的?1個月能看出什麼來,實驗還沒做完一輪呢。」


「之所以弄成這樣,是因為它有價值」,韓春雨說。基因編輯技術在治療人類疾病上有不錯的發展前景。若真如論文中所說的高效,NgAgo或將成為繼CRISPR-Cas9之後的第四代基因編輯技術,這意味著,NgAgo有可能成為瓜分基因編輯這塊商業沃土的一份子,在一定程度上和同類技術存在利益衝突。


「你想想它動的誰的蛋糕最大,其次動的誰的蛋糕最大」,韓春雨說,「然後動了誰的蛋糕,你就會比較清楚了。」


韓春雨反覆提及的一件事是,美籍華人科學家張鋒和詹妮弗·杜德納爭奪CRISPR-cas9專利的官司,背後牽扯到數千萬美元的利益。他還從微信群聊記錄里翻出一條新聞,國外一家研究CRISPR的公司已經拿到3800萬美元B輪融資。


「你想,CRISPR(註:第三代基因編輯技術)出來,TALEN(註:第二代基因編輯技術)就沒有市場了。TALEN還成功治癒了一例白血病了。沒有CRISPR的話,TALEN的市場將是上百億美金。」韓春雨說。


在韓春雨看來,自6月開始紛沓而至的質疑聲歸結於利益的衝突。但科學新聞雜誌社總編輯、《自然·生物技術》等雜誌特約記者賈鶴鵬認為,「到目前為止有關韓春雨NgAgo基因編輯技術是否可重複這一爭議本身,既不是陰謀論的產物也不代表商業利益壓制學術,而恰恰代表了科學共同體內部最為正常的學術競爭邏輯。」


今年3月去杭州見合作者,是韓春雨第一次坐飛機。


韓春雨不經意間喜歡拿張鋒作比較


在韓春雨的實驗室,立在一片灰黑色調中,一塊黃底紅字的牌匾很顯眼——7月,中共河北省委、河北省人民政府將韓春雨課題組命名為「高層次創新團隊」。


論文發表後,韓春雨的應酬多了不少。


除了學者拜訪,與中央統戰部領導、全國人大常委會委員的會見也出現在日程表裡,有的一聊就是兩個小時。


他沒有主動安排過採訪,但也不太拒絕媒體的採訪。採訪邀請如流,索性就一次群訪,10來平米的房間里滿滿當當地塞下6、7個記者。報道像雪花一樣發表。很多人通過報道知道,他是一個喜歡古琴、紫砂壺、《論語》的科學家。韓春雨孩子所在的學校也傳遍了,說有個學生的爸爸是個「網紅科學家」。


韓春雨身上還貼著很多標籤——三無(無名校、無名氣、無職位)科學家、小作坊式科研、未來諾獎潛在衝擊者。一位學術出身並不矚目、供職於二本高校、科研經費吃緊的副教授,卻取得世界級重大科學發現,有媒體稱之為「韓春雨現象」。


韓春雨的學術訓練都在國內完成,1996年在河北師範大學拿到生物系學士後,他分別在中國農業科學院和中國協和醫科大學攻得碩士、博士學位。博士師從分子生物學專家、中國科學院院士強伯勤。自2006年起,任職於河北科技大學。在此背景下,韓春雨的突破,被媒體賦予了更深層次的意義:接受完全本土的科學訓練,同樣可以作出頂尖的科研突破。


但韓春雨並不喜歡這些標籤,覺得「三無」不是讚揚,至少「在其他科學家眼裡不是這樣」。有教授打電話給他,直接說做不出來,不願意耐心地交流自己的實驗細節,韓春雨覺得很沒禮貌。


「這裡面也是傲慢與偏見,和身份有很大的因素。如果我是張鋒、詹妮弗這樣的大牛,(他們)不會輕易地來找我。就因為我是三無,是平民。」韓春雨保持著一貫的慢語速說。


在此之前,半游離於學術圈,一心在校科研的韓春雨並沒有見過很多同一個圈子的科學家。「現在支持或反對的,和我以前都是毫無瓜葛的。我的導師比較有名,但也是10幾年前的事了。」


「這件事從一開始就受到國外很多學者的質疑,很重要的原因是他(韓春雨)長期游離於圈子之外,大家不知道從哪裡冒出來這樣一個人,給了大家一個完全不同的結論。我們可以試想一下,如果是張鋒給出同樣的結論,大家的反應或許沒有那麼劇烈。這倒不是說張鋒更有名,實際上張鋒是80後的科學家,在這個領域裡也算是新人,但是他在圈子裡早已被同行認可。」

實驗室外對話韓春雨:公布所有數據不就等於韓寒公布手稿嗎?



張鋒


張鋒和詹妮弗都是在另一種基因編輯技術CRISPR-Cas9的領軍性人物。其中,張鋒是在人體細胞中使用CRISPR-Cas9的第一人,成為諾貝爾獎的熱門人選。韓春雨不經意間愛把自己和張鋒進行比較。


有人提出想參觀韓春雨的實驗室,韓春雨不同意:「這也不合理。張鋒從來沒有讓任何人進實驗室,作為學習參觀。在改進技術的時候,你進去拍下來,那就是商業間諜。」


被問及怎麼看待國內媒體稱他的研究為「諾獎級」,韓春雨拿著茶壺去接水,並沒有直接回答,邊走邊說:「作為科研工作者,不應該以身份定。搞科研,大家都是一樣的。」


「他是我認為最適合科學研究的那一類人」


在知乎,一位匿名網友,表示自己曾是韓春雨的學生,他描述了一個對科研有主見的韓春雨。


這名匿名網友回憶,因為瞧不起將時間耗費在申請經費上的老師,韓春雨在學校的人緣不是很好,很多老師不在課上引薦韓春雨給本科生。加上當時韓春雨的課程安排在大四上的一門選修課,他很少接觸到生物學本專業的學生,經常招不到研究生。以至於2013年的時候,韓春雨在河北科技大學的貼吧上毛遂自薦,開了個題為「生工學院,因為喜歡科學而想考研究生的進」的帖子。


韓春雨喜歡對科研純粹的學生。2014年就研究生畢業,但沒有離開實驗室的高峰是其中之一。高峰要畢業時,他和韓春雨剛確認了NgAgo,正是他們一心想要尋找的,可以在37攝氏度常溫下進行基因切割操作的內切酶。


高峰選擇留下來,繼續NgAgo的進一步研究,直到以第一作者的身份(韓春雨為通訊作者),在《自然·生物技術》發表論文。期間,高峰的主要工作是在BLAST基因組資料庫中篩選可能的Ago酶,以及體外的剪切實驗。


尋找酶,而不是改造酶是韓春雨做的一次關鍵性決定。2014年,荷蘭科學家約翰·范德歐斯特(John van der Oost)證實Ago家族的蛋白酶可以較精準地切割基因組靶點。但這些酶大多需要在60攝氏度以上才能有活性,沒有實踐意義。大多數人的思路是改造酶的結構,做逆向工程,但韓春雨沒有,他覺得這是有悖進化的。


尋找的過程花了3個多月。韓春雨曾對媒體回憶那個對他和高峰非常重要的時間——2014年5月中旬的凌晨3點,韓春雨在旁指導,高峰操作,確認了NgAgo符合他們的要求。實驗結束後,校門已經關了,因為興奮,韓春雨翻過學校半人高的圍牆跑回家。回到離實驗室5分鐘騎行、58平方米的老房子後,韓春雨整晚失眠。


對這位跟隨他至少4年的研究生,韓春雨不吝嗇自己的讚美,也將自己和高峰的關係形容為「合作的夥伴,學術上交流討論」。高峰留校後,韓春雨每月從自己7000元的工資里抽出2000元資助高峰。


澎湃新聞到訪時,見到了高峰,他很少開口說話。正是傍晚時分,高峰提著透明的塑料袋,洗澡歸來,上樓進了自己位於實驗樓里的住處。


在貼吧上,韓春雨曾給自己的招生帖跟帖,談師徒關係:「研究生是專業教育,是真正的師徒式的學習。所以,導師的不同,決定了你的career走向和成敗。」


韓春雨透露已有六七家實驗室成功複製


就目前的公開信息來說,國內僅有中國科學院神經科學研究所研究員、博士生導師仇子龍就實驗操作和實驗結果進行了實名聲明。在被傳成功重複後,7月21日,仇子龍在個人認證微博上表示,目前的實驗結果距離韓春雨論文中的結果「相差甚遠」。


截至發稿前,已有3位國內學者匿名為NgAgo背書。據《自然》雜誌8月8日的報道,一位不願意具名、獨立於韓春雨實驗室的中國研究員證實了NgAgo的有效性,儘管效率不如CRISPR-Cas9,但通過測序可以鑒定出,NgAgo能在預期的位點誘導遺傳突變。此外,另有兩位匿名的中國學者表示,他們的實驗結果已經初步表明NgAgo有效,但還需要進一步確認。


在科學上,一般不會主動做成功還是失敗的聲明。「無論做出來還是做不出來,都是需要嚴格的數據去證明。如果誰沒做出來,也是不方便提,因為今天做不出來不代表明天做不出來。如果做得出來呢,像我們,做出來效率也不是那麼高,然後馬上又面臨很多很煩的問題。」上述學者說。


在現實層面上,關於NgAgo實驗能否重複、韓春雨是否造假的討論已不只是單純的科學討論。


當該學者對外發文說自己重複成功,但由於效率不高,需要優化時,他沒有想到事情的後續會這麼發展。「收到無數人的簡訊、來電,和我微信、郵件,詢問我實驗細節等等,不勝其擾」。對於探討實驗細節的詢問,他會回復,但「有些根本不是在意我們的實驗細節,而是上來就想從我的實驗細節里否定我的實驗」。


「我做這個聲明,是基於一個學術的討論,沒想到導致了很多騷擾。這完全不是我所說的科學範圍之內的討論了。」上述學者說。


是否公開對NgAgo重複實驗的結果,還有其他的考量。國內另一位不方便具名的學者告訴澎湃新聞,他的重複實驗結果不支持韓春雨的結論,還知道「其他人都說了重複不出來」。之所以沒有公開表示自己重複實驗失敗,是因為有了其他新的發現,正在進一步研究機理,還未到發表的時候,不便公開自己的實驗結果。


在幾周前,英國醫學研究理事會(MRC)再生醫學研究所的博士後Pooran Dewari發起了關於NgAgo的在線問卷。截至8月9日,在近200名參與投票的人中,投票重複成功的人數為8位。這一數字在8月1日還僅為1位,Dewari在推特上表示,投成功票的8位中,有5位在15分鐘內完成了投票。


當澎湃新聞向韓春雨詢問是否有實驗室成功複製時,他表示,有,而且能準確地說出是哪些實驗室,有6、7家實驗室做出了圖4環節,但他說,不方便告知。


為何成功的實驗室不宣布?韓春雨:「憑什麼讓他們說出來?說出來像仇子龍一樣被攻擊?」


如果你公開成功的實驗室名單,就能打消「至今沒有實驗室宣布重複成功」的核心質疑,為什麼不這麼做?韓春雨:「這樣就把人家給坑了。」


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