抗體的保存，你做對了嗎？

抗體是免疫系統中最重要的分子之一，其穩定性是自然進化篩選的結果。外界條件的改變對抗體的穩定性有很大的影響。抗體由於性質和所使用的存儲條件不同，其存儲的「保質期」可能從幾周年到幾年不等。抗體的存儲時間取決於抗體的性質和存儲條件，儘管每個抗體存儲的最佳條件是獨特的，但還是能夠總結出一些存儲建議和一般準則。

1.低溫存儲對抗體的保存至關重要

一般來說，抗體最好存放在≤4℃的清潔，滅菌的玻璃或塑料管。貯存在室溫下通常會由於微生物的生長導致抗體退化和/或失活。如果要長期保存則最好是在-20℃ or -80℃。最關鍵的一點是要根據說明書推薦的方式來正確的保存抗體！

但是，腹水形式的產品請在收到後立即凍起來！因為該類產品含有大量的蛋白酶，長期在4℃保存會導致抗體的降解！

絕對避免將抗體保存在自動除霜冰箱中。盡量將抗體保存在冰箱裡層，而不是門上。

分裝可以最大程度的降低反覆凍融對抗體活性的損害，同時也降低了由於多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。

分裝的量以一次實驗用完為好，最少不能少於 10ul每份。因為分裝體積越小，抗體的濃度越可能會受到蒸發以及管壁吸附的影響。復融後的分裝抗體如果一次用不完，將剩餘母液保存在4℃，避免再凍起來！抗體工作液應該當天配製當天用完，在4℃盡量不要超過1天。

絕對不能凍融的情況是：

（1） 酶標抗體，絕對不能凍存而應4度保存。凍融會降低酶活力以及影響抗體結合的能力。

（2） 偶聯型抗體，無論是跟熒光素，還是酶、生物素偶聯，都應該避光或者錫箔紙包裹保存。見光會降低偶聯抗體的活性。特別是熒光抗體，其對光很敏感，實驗期間必須全盤避光。

（3）IgG3的同型抗體，其在復融時很容易形成多聚體，所以必須保存在4度。

2。向抗體儲存液中加入抗氧化劑是防止抗體因氧化失效的關鍵步驟

氧化反應是某些酶，尤其是巰基酶的共同問題。為了防止氧化反應對抗體的破壞，我們可以向抗體中加入一些還原劑（如二硫蘇糖醇（DTT）或2 - 巰基乙醇（2-ME））。實驗證明：越高的pH環境和溫度，有酶活性的抗體的保存時間越短。此外，加入0.1mM的銅離子，其氧化率增加；而加入金屬螯合劑EDTA可增加有效期。

3. 蛋白質穩定劑和抗生素對抗體的穩定儲存發揮著重要作用

可以延長大多數蛋白質在4℃或-20℃的保質期。而25-50％的甘油或乙二醇等防凍劑有助於穩定抗體，防止在-20℃環境中形成冰晶，避免其破壞蛋白質的結構。有些人會加 50%的甘油到抗體中來避免反覆凍融，甘油在-20℃會降低冰點。這對很多抗體可能是可行的。加入甘油的溶液不建議在-80℃保存，因為這已經超過了甘油的冰點。如果您要加入甘油來保存抗體的話，請謹慎注意無菌操作，避免污染！

蛋白酶抑製劑的加入可以防止抗體發生水解反應導致其失活。而抗微生物藥物，如最終濃度在0.02-0.05％（W / V）的疊氮化鈉（NaN3的）或可以抑制微生物的生長。如果抗體用於染色或處理活細胞，用於體內研究，不能使用疊氮化鈉。

另外，要偶聯帶有氨基基團的抗體：疊氮化鈉會干擾任何含有氨基基團的偶聯，因此在進行偶聯之前，應將疊氮化鈉去除。

蛋白在高濃度時更不容易降解（1 mg/ml 或者更高），這就是為什麼在抗體中加入 BSA 之類作為穩定劑的原因了；另一方面，加入的蛋白也可以減少抗體由於管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來標記的話，則不能加入蛋白穩定劑，因為這些穩定劑會和抗體一起競爭結合標記物

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