HKOH-1:檢測內源羥基自由基的高敏感性高選擇性熒光探針
大家好,推薦發表在Angew上的文章:HKOH-1: A Highly Sensitive and Selective Fluorescent Probe for Detecting Endogenous Hydroxyl Radical in Living Cells,通訊作者是來自香港大學的楊丹教授,他們組主要致力於具生物活性的天然產物的全合成及其相關的化學生物學研究以及用於探測細胞生理過程的熒光感測器的開發。
ROS是在細胞信號轉導和應激反應中起重要作用的一類物質,其中羥基自由基是其中最為活潑,傷害力非常大的一種,它的半衰期非常短,大約為10的負九次方秒,但是卻能和大量的生物大分子,例如DNA鹼基,脂質和蛋白等,導致細胞損傷以及多種疾病。但也由於它的高反應性,使得當前還沒有可靠的方法去檢測內源產生的羥基自由基,原來商業化應用於檢測羥基自由基的探針HPF,由於其不能很好的區分過氧亞硝基和羥基自由基,其應用收到限制。
本篇文章作者報道了一個熒光探針HKOK-1---它基於羥基自由基和一個例如二碘苯酚類的酚類化合物反應會發生電。子轉移,生成苯氧基自由基,最終分解生成芳香族化合物,而過氧亞硝基由於二碘苯酚中碘存在的空間位阻,無法繼續反應從而解決了原來探針特異性差的問題。
作者進一步利用這個探針在體外條件下對一系列能夠清除羥基自由基的物質進行清除能力的定量,作者設計了一個可以被細胞攝取以及保存的探針HKOH-1r,分別利用共聚焦成像和流式細胞術測定細胞內源產生的羥基自由基,利用UV照射Hela細胞,檢測Hela細胞內源響應的羥基自由基的產生。
因此,HKOK-1可以作為揭示羥基自由與相關的生物功能的一個重要工具。
原文引用:
DOI: 10.1002/anie.201705873
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/anie.201705873/epdf
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