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Plant Cell:清華大學揭示擬南芥IY0和QQT2在RNA聚合酶組裝中的作用機制

2018年1月21日,清華大學生命科學學院和植物生物學研究中心戚益軍研究組The Plant Cell雜誌在線發表了題為「A Role for MINIYO and QUATRE-QUART 2 in the Assembly of RNA Polymerases II, IV and V inArabidopsis」的研究論文,報道了擬南芥IY0和QQT2在RNA聚合酶Pol II, Pol IV和Pol V組裝中的作用機制。

DNA甲基化是一種重要的表觀遺傳學修飾。在植物中,DNA甲基化發生於CG,CHG和CHH序列。DNA甲基化在這些序列的建立都依賴於一條RNA介導的DNA甲基化(RNA-directed DNA methylation,RdDM)途徑。RNA聚合酶Pol IV和Pol V在RdDM途徑中分別負責產生小干擾RNA(small interfering RNAs,siRNAs)和長非編碼RNA(Long Intergenic Noncoding RNAs, IGN RNAs)。siRNA和AGO4結合併與IGN RNA互補配對,招募甲基轉移酶DRM2(Domain Rearranged Methyltransferase 2)至靶標位點建立DNA甲基化。Pol IV和Pol V由Pol II進化而來,Pol IV和Pol V的亞基數目及構成與Pol II類似。人和酵母中Pol II的組裝起始於RPB3/RPB11二聚體的形成,RPB10和RPB12結合RPB3/RPB11二聚體形成RPB3組件,之後RPB2和RPB1組件形成,這三個組件在細胞質中結合形成全酶,最後被運入細胞核。植物中Pol II, Pol IV和Pol V的組裝機制尚不清楚。

戚益軍課題組通過正向遺傳學篩選,獲得了IYO,QQT2和NUCLEAR RNA POLYMERASE B11/D11/E11(NRPB/D/E11)的突變體。在這三個突變體中,siRNA,IGN RNA和DNA甲基化水平均有顯著下降。通過免疫共沉澱和定量質譜實驗發現,在iyo和qqt2突變體中,Pol V不能有效組裝。進一步研究發現,IYO和QQT2與NRPE3組件互作並在NRPE3組件形成之後發揮功能,它們很可能起到連接NRPE3和NRPE2組件的作用。該研究還發現IYO和QQT2直接結合,並在與NRPE3組件互作時相互依賴對方。最後,該研究發現IYO和QQT2在Pol II和Pol IV的組裝中也起重要作用。該研究首次報道了兩個參與植物RNA聚合酶Pol II, Pol IV和Pol V組裝的新因子,並揭示了Pol II, Pol IV和Pol V的組裝機制。

A model for the role of IYO and QQT2 in Pol V assembly.

據悉,清華大學生命科學學院博士研究生李瑤曦袁宇翔和博士後方曉峰為本文共同第一作者,戚益軍為通訊作者。

值得一提的是,戚益軍研究組上個月在Developmental Cell發表論文,報道了AGO1促進基因轉錄的全新功能。「BioArt植物」在第一間對該成果做了報道。相關鏈接:Developmental Cell: 清華大學戚益軍研究組揭示植物中AGO1促進基因轉錄的全新功能

戚益軍簡介:

戚益軍博士現為清華大學生命科學學院和植物生物學研究中心教授。戚益軍教授長期從事小RNA的生物學功能和作用機理研究。戚益軍研究組圍繞植物小RNA的發現、功能和作用機制開展了系統研究,取得的一系列主要原創性成果,包括:1)發現並命名了兩類新型小RNA:參與DNA修復的diRNA和介導靶基因DNA甲基化的lmiRNA;2)闡明了植物小RNA進入AGO蛋白的分揀機制;3)揭示了植物siRNA和miRNA通路中新的重要調控步驟。項目組的研究成果發表在Cell、Molecular Cell、Developmental Cell、Nature Plants、Plant Cell、Genes &Development等期刊上。多項研究成果得到Nature、Cell等國際一流學術期刊的亮點評價,其中報道diRNA的論文被Cell雜誌評為2012年度最佳論文之一。戚益軍教授作為第一完成人的項目「植物的小RNA功能及作用機理」獲2016年度國家自然科學獎二等獎。


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