柱層析加樣與洗脫過程

先把被分離的樣品仍在一定體積的溶劑。選用溶劑的極性要低，體積要小，但是這受樣品溶解度限制，有的成分還有很多極性基團。在苯或石油醚等極性小的溶劑中，溶解度很小，需要用大量體積的溶劑，為此就要選用氯仿等極性比較大的溶劑溶解，如果有的成分在氯仿中溶解度很大，可以將樣品先溶於少量氯仿中，再加入一定量的苯配成溶液，這樣既降低了溶液的極性，體積又不會太大，體積太大，往往是色層分散不集中，一般體積最好不要超過所用吸附劑重量的數，如有特殊情況，也可以適當加大。

把上面配好的樣品溶液加入吸附柱前，首先將柱上端多餘的溶劑放出，直到注入液體表面，到達吸附劑的表面時，停止放出溶劑，沿著柱管壁加入樣品溶液，注意不要讓溶液把吸附劑沖鬆浮起，溶液加完後，開放活塞，讓液體需放出至液面，與吸附劑面相齊，再用小劑量溶劑沖洗原來成樣品的容器兩三次，全部加入層析柱，開始收集流出的洗脫液。

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