經輸卵管核酸傳遞進行的基因改造：大鼠基因改造新方法

Attention！這篇論文是通過BMC Biotechnology快速通道發表的！

基因改造動物模型在研究領域應用廣泛。基因修飾技術近年來發展迅速，尤其是 CRISPR/Cas9技術使構建轉基因動物模型更加便捷迅速。但模型構建的步驟大都比較複雜，需要特殊的技術，例如在體外處理受精卵等。許多研究人員都期待能有更為簡單方便的基因修飾技術。

Takayuki Koyano and Makoto Matsuyama

實驗室大鼠（褐家鼠）是常用的模擬人類疾病的動物模型之一。儘管和小鼠比，大鼠模型有諸多優勢，但對大鼠基因進行改造的技術相對落後。最近，新的大鼠基因改造技術問世，即經輸卵管核酸傳遞進行的基因改造（rat Genome-editing via Oviductal Nucleic Acids Delivery， rGONAD）。 rGONAD有兩個關鍵步驟，第一是向雌鼠輸卵管內注射含有Cas9蛋白、前導RNA、單鏈DNA的注射液，第二步就是通過電導使注射物在輸卵管內定向移動。 rGONAD處理的雌鼠可以繼續妊娠直至分娩，產下的幼鼠已完成基因改造，可用於下一步實驗研究。rGONAD技術可用於基因插入和敲除。

目前主流的基因修飾技術主要包括三步，將受精卵從雌鼠體內分離，在體外進行顯微處理，將改造後的受精卵轉至假孕的雌鼠體內。這些過程操作複雜，需要長時間訓練，而rGONAD則克服了這些缺點。此外rGONAD還更符合實驗動物的3R原則（減少、替代、優化），傳統的基因改造技術需要多隻雌鼠而rGONAD技術中的雌鼠則可以反覆利用。目前GONAD技術已成功應用於大鼠和小鼠，該技術的理念還可用於其他動物模型。因此未來GONAD很可能成為動物實驗領域的一大利器。

第一步 懷孕雌鼠

第二步 將注射液（含有Cas9蛋白、先導RNA、單鏈DNA）注入雌鼠輸卵管內

第三步 通過電導技術使注射液定向移動

第四步 雌鼠繼續妊娠

第五步 產生基因改造幼鼠

長按並提取二維碼瀏覽BMC期刊列表

BMC是施普林格?自然旗下機構。作為開放獲取出版先鋒，BMC不斷推出一系列高質量的同行評議期刊，包括BMC Biology、BMC Medicine等涵蓋範圍較廣的期刊，以及Malaria Journal、Microbiome和BMC系列期刊等專門刊物。BMC以「科研永不止步」為信條，致力於不斷創新，以更好地滿足作者群體的需要，確保所發表論文的完整性，並積極推廣開放研究。

喜歡這篇文章嗎？立刻分享出去讓更多人知道吧！