實驗小白如何預防細胞污染

養細胞會讓實驗小白茶飯不思，擔驚受怕，即使大好春光出去陪美眉或者小哥哥，也是牽腸掛肚，心不在焉。

萬一污染了又要看到師兄師姐鄙視的目光，嫌棄的嘴角，還有因為污染造成其他戰友的驚恐不安，想想都怕怕。

師姐A：師妹！！！讓你養著玩的細胞又污染了。

師姐B：納尼？！

師姐C（火速趕往案發現場）：我的心肝寶貝細胞你還好么？

師兄A（實驗室唯一男性）:天啊！！！並致電女票：「親愛的晚上不能陪你了，新來的師妹細胞又污染了，我又要給培養箱滅菌了」。

師妹：我是罪人，好丟臉。

實驗小白如何避免細胞污染呢？

「師妹過來，師兄手把手教你，如何預防細胞污染。」想當年師兄就是靠養細胞培養起來的重度潔癖。

常規操作不再贅述，主要安利以下內容：

1. 仔細閱讀所在實驗室的細胞室綜合管理制度，嚴格遵守制度。

2. 細胞室室內滅菌可以交叉進行，熏蒸、臭氧、紫外、新潔爾滅。

3. 根據細胞室空間，限制同時進入人數。

4. 超凈工作台使用前後，紫外燈照射滅菌。使用前、後需用酒精棉球擦拭工作區消毒（小竅門：超凈台使用完畢後，可以用酒精噴洒桌面，再用抽紙擦乾淨，比用酒精棉球乾淨多嘍！使用前不建議這種方法擦拭）。物品放入超凈台前均應酒精噴洒消毒，超凈台內嚴禁堆放過多物品，以免影響風路平衡。

5. 水浴鍋使用完畢後及時將水倒掉，並保持鍋內乾燥。常用水浴鍋時，每周將水浴鍋中的水至少煮沸一次，以防細菌滋生。

6. 從培養箱取放細胞前，用酒精清潔雙手（或手套），盡量縮短開門時間和減少開門次數。培養瓶放入培養箱前，用酒精消毒表面，並稍等至酒精揮發後再放入，以免培養箱內滯留過多乙醇蒸氣。

7. 培養箱用水每周更換一次，更換前托盤用酒精擦拭、紫外燈照射30分鐘殺菌。

8. 滅完菌槍頭，烘箱烘乾後存放，保質期1周。逾期需重新滅菌使用。

9. 培養液、胰酶、PBS等試劑盡量不和別人共用，應單獨分裝使用，以免交叉污染，也便污染後自查原因。

10.在使用0.22μm的微孔濾膜過濾自配溶液時，注意無菌操作規範，以防濾液污染。特殊情況可檢菌安全後使用。

11.除特殊要求外，建議培養基中添加雙抗，算是送給細胞的守護神。

12.防護服、口罩、手套缺一不可。隔壁細胞室負責人是韓國回來的博士，讓學生只戴手套操作，於是經常聽他們說細胞掛了。

13.操作前，準備好所有實驗所需物品，以減少走動；物品需有序擺放在超凈台觸手可及的地方，同時空留足夠操作空間。

14.操作時，試劑不用盡量及時蓋上蓋子，移至操作區外圍，盡量不要從開口容器上經過。

15.使用移液槍時，將容器傾斜以便於移液，切勿將槍桿碰觸瓶口及內壁。一旦發生倒吸情況，要及時用酒精棉球擦拭，以免液體殘留導致細菌滋生。

16.先取試劑、耗材，再取移液槍、安裝槍頭。很多人習慣先安裝槍頭，然後去

拿試劑、耗材，殊不知無意間槍頭已經觸碰其他地方導致污染。

17.向廢液缸打廢液時，需輕柔，以免造成水花四濺，污染槍頭、槍體。實驗結束，及時倒掉廢液缸垃圾，沖洗之後噴洒酒精，放入超凈台紫外照射殺菌。

18.培養基滴在桌面時要及時用酒精棉球擦拭，切記不要等實驗做完再處理。因為那樣，你的檯面上就會永久留下一個印記，對於強迫症的人來說，不！能！接！受！！！！

19.凍存細胞時凍存管蓋子需擰緊。復甦細胞時，從液氮罐取出凍存管，輕擰蓋子，以確認蓋子是否擰緊。鑷子夾住凍存管蓋子與管體交界處，在37度水浴鍋中快速解凍，水面不可超過凍存管蓋沿；不建議直接扔進水中，以免水滲入造成污染。

20.一旦污染，及時處理，不到不得已不建議施救；查找原因，防止再犯。

總的來說，防患未然比亡羊補牢強得多。操作過程中對於模糊不清的，寧願認為是有菌的棄掉，也不要心存僥倖！

師妹，你明白了么？！！好啦，今天講到這！下次告訴你如何養出狀態好、形態正常的細胞！！師妹，好好學吧！

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