我院肺炎支原體檢測的五種方法

最新 07-12

肺炎支原體肺炎佔住院兒童社區獲得性肺炎的10-40%，近年來5歲以下兒童MPP的報道有所增多。臨床表現以呼吸系統感染為主，起病可急可緩，以發熱和咳嗽為主要表現。中高度發熱多見，也可低熱或無熱。其病原體為肺炎支原體，直徑為2-5微米，是最小的原核致病微生物，缺乏細胞壁，故對作用於細胞壁的抗菌藥物固有耐葯。我院檢驗科採用了多種檢測方法，對肺炎支原體感染進行輔助診斷，包括病原學方法、血清學方法和核酸檢測等，每種方法都有其自身特點，現總結如下：

一、門急診化驗室流向的「肺炎支原體IgM（金標法）」

該方法採用膠體金免疫層析技術，能夠檢出特異性抗肺炎支原體IgM抗體。IgM型抗體是機體感染肺炎支原體最早出現的抗體，一般在感染後5-6天可被檢出，當滴度達到1:160時顯示為陽性，抗體陽性持續時間可達數月（個體差異較大）。

檢測標本為EDTA抗凝的靜脈血（2毫升）或末梢血（200微升），可與血常規同采一管血。報告回報時間為30分鐘。

二、免疫室流向的「肺炎支原體抗體」（被動凝集法）

該方法將肺炎支原體細胞膜成分包被在人工載體明膠粒子上，和樣品中的肺炎支原體抗體進行反應發生凝集，由此可以檢測出血清中的肺炎支原體抗體，並且可用來測定抗體效價。該方法檢測的是抗肺炎支原體抗體的總和，包括IgM和IgG，當滴度達到1:160時報告陽性。IgG類抗體於感染後20天左右產生，在一個月達到高峰，在體內可持續1.5-2年。

檢測標本為血清，采靜脈血（黃帽管）不低於2毫升送檢。周一至周五上午9點前送檢，當日下午可回報結果；陽性標本需第二天複檢後報告。

三、免疫室流向的「呼吸道病原體抗體系列檢測」（間接免疫熒光法）

該方法採用免疫熒光的方法，為組合檢測，可同時檢測9種呼吸道病原體的IgM，包括肺炎支原體、呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒A 型、流感病毒B 型、副流感病毒、肺炎衣原體及嗜肺軍團菌。當滴度達到1:100時報告陽性。

檢測標本為血清，采靜脈血（黃帽管）不低於2毫升送檢。周一到周五送檢，三天內回報檢測結果。

四、微生物室流向的「肺炎支原體培養加藥敏」

肺炎支原體分離培養是診斷肺炎支原體感染的可靠標準，但是常規培養需要10-14天甚至更長，對臨床早期診斷的意義不大。我院檢驗科採用的快速鑒定培養基是一種肺炎支原體選擇性培養基，內含快速生長因子和紅色pH值指示劑。當有肺炎支原體增殖時，糖類分解，產生酸性代謝物，培養基顏色由紅轉黃。葯敏板中有9種抗生素：紅霉素、羅紅霉素、克拉黴素、阿奇黴素、乙醯螺旋黴素、克林黴素、左氧氟沙星、加替沙星和司帕沙星。利用9種抗生素的高低濃度在體外對微生物生長的抑制作用，分析肺炎支原體的耐藥性。

檢測標本為咽拭子，用一次性無菌干拭子（不能用轉運拭子）在咽後壁和兩側扁桃體部位捻轉數次，避免觸及舌部。取標本時要適度用力，儘快送檢。每天都可送檢，轉天回報結果。葯敏結果只報告敏感、中介和耐葯，沒有具體的MIC值。