華氏巨球血症的蛋白質學診斷
雖然骨髓瘤可能與血清中存在的多種免疫球蛋白類型(IgG,A,D或E,遊離清鏈)的單克隆成分相關,但華氏巨球血症卻是以血清中的高濃度單克隆IgM為病理特徵的一種疾病。巨球蛋白血症的命名與高分子量的IgM單克隆五聚體有關。
血清蛋白的剖析
1,血清總蛋白及循環中IgM存在的意義
此類患者常出現總蛋白增高但少於多發性骨髓瘤,較少超過100g/L,由此導致血沉降率明顯增高。
單克隆IgM導致高血粘滯度較多發性骨髓瘤中更為頻繁,並可導致神經系統紊亂。血漿蛋白置換可糾正高血粘滯度的影響。
當IgM達到高濃度時往往可見血容量增加。常導致貧血加重並引起心血管系統超負荷。
不出現高鈣血症(未釋放OAF),但在總蛋白明顯增加的情況下可能出現陰離子的明顯降低。
2,電泳
在β或λ區可見緻密而均質條帶。有時由於多聚體的IgM導致凝膠的加樣孔點樣處和整個泳道出現沉澱。這時有必要用β巰基乙醇還原處理後再作進一步的檢測。以下情況可出現2個條帶:
五聚體IgM伴隨7s單體亞單位,經β巰基乙醇處理雙條帶消失;
單克隆IgM伴隨過剩的遊離輕鏈
雙克隆丙球蛋白血症:免疫球蛋白伴隨另一種輕鏈不同的IgM,或伴隨輕鏈相同或不同的IgG/IgA。
3,免疫球蛋白定量
IgM含量相當高,通常超過10g/L,且有時可達30到40g/L,但用免疫化學定量法測定,其含量會被高估。
如同其他類型的單克隆免疫球蛋白的定量一樣,利用光密度掃描,電泳圖譜很容易定量lgM的單克隆。
在該疾病中其餘的免疫球蛋白一般正常或輕度降低,這與多發性骨髓瘤相反,後者的其他正常免疫球蛋白合成呈現抑制。
4,免疫電泳或免疫固定電泳
免疫電泳
抗IgM抗血清提示的沉澱弧通常被認為是彎曲的,呈特徵性的鐮刀狀。為了更好地顯示所謂「傘狀效應」而掩蓋的輕鏈的沉澱弧形狀,有必要用還原劑巰基乙醇預處理血清。
免疫固定電泳
不同聚合體形式的IgMκ,經還原劑處理後使得多聚體變成單體。
常規情況下不採用巰基乙醇進行預處理。
SEBIA免疫固定電泳圖譜如下所示。
IgMκ單克隆組分
IgMλ單克隆組分
IgMκ單克隆組分
IgMκ單克隆組分
5,冷球蛋白的研究
一般來說,在華氏巨球蛋白血症中,I型冷球蛋白血症(單一性單克隆IgM)或Ⅱ型冷球蛋白血症(伴隨一種或多種多克隆免疫球蛋白)較在多發性骨髓瘤中更為常見;雷諾氏綜合征具有比較重要的臨床意義,暴露於寒冷環境中的特定皮膚區域會發生壞疽,血管性紫癜。
有時所有單克隆IgM在自然狀態下均為冷球蛋白。樣本在常溫條件下,血清電泳圖譜中無法發現單克隆IgM。必須在血液凝固後將樣本置於37℃預處理。
冷球蛋白可通過免疫電泳或免疫固定電泳的分離,洗滌及β巰基乙醇預處理作出分型。
尿蛋白質學分析
1,蛋白尿
通常出現輕度蛋白尿,含量有限,且不如其在骨髓瘤中的意義。
2,尿蛋白電泳
可檢出低濃度的本周蛋白。由於IgM的高分子量使其在尿液中幾乎不被檢出,因此本周蛋白極少伴隨完整的單克隆IgM。
3,免疫電泳和免疫固定電泳
兩種方法均可對骨髓瘤作出一致的剖析。
本周蛋白通常是孤立的,因為與抗IgM重鏈(μ)抗血清顯示陽性反應往往意味著單克隆IgM單體或IgM片段存在於尿液中。相對於多發性骨髓瘤,華氏巨球血症中比較少見腎功能不全。
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