Exp Ther Med：轉染人BMP-2和EGFP重組腺病毒可增強兔骨髓間充質幹細胞的成骨作用

導語：Ad-hBMP-2/EGFP過表達BMP-2，通過刺激Wnt信號通路，促進β-catenin的積累和GSK3β的抑制，提高了兔BMSCs的成骨分化能力。

來源：梅斯醫學

骨髓間充質幹細胞（BMSCs）是骨組織工程中最重要的種子細胞。本研究旨在探討兔BMSCs轉染人BMP-2和EGFP重組腺病毒後在成骨過程中的潛力。

分離兔BMSCs，通過流式細胞儀檢測表面幹細胞標誌物，包括CD29、CD44和CD45。採用逆轉錄-定量聚合酶鏈反應和Western blot分析檢測BMSCs中BMP-2 mRNA和蛋白的表達。成骨培養基誘導後，使用ALP活性試劑盒，免疫組織化學染色和茜素紅S染色，分別檢測第7天的鹼性磷酸酶（ALK）活性，第14天的I型膠原和第21天的鈣結節。通過蛋白質印跡分析檢測與Wnt信號傳導通路相關的蛋白質的表達水平。

結果顯示，CD29，CD44和CD45的陽性率分別為62.92±1.99,93.55±0.99和0.21±0.12％。在Ad-BMP-2/EGFP轉染的BMSCs中BMP-2 mRNA和蛋白的表達顯著上調。此外，Ad-BMP-2/EGFP誘導ALP活性，促進兔BMSCs中I型膠原和鈣結節形成的產生。在Ad-hBMP-2/EGFP轉染的BMSCs中，β-連環蛋白、細胞周期蛋白D1、Runx2和c-myc的水平上調，而GSK3β的水平顯著降低。結果還表明，Ad-hBMP-2/EGFP過表達BMP-2，通過刺激Wnt信號通路，促進β-catenin的積累和GSK3β的抑制，提高了兔BMSCs的成骨分化能力。預期Ad-hBMP-2/EGFP轉染的兔BMSCs是骨組織工程中的良好種子細胞。

原始出處：

Wu CC, Wang F,Enhancement of osteogenesis of rabbit bone marrow derived mesenchymal stem cells by transfection of human BMP-2 and EGFP recombinant adenovirus via Wnt signaling pathway. Exp Ther Med. 2018 Nov;16(5):4030-4036. doi: 10.3892/etm.2018.6735. Epub 2018 Sep 13

本文系梅斯醫學（MedSci）原創編譯整理，轉載需授權！

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