您的細胞到底有多少氧可以利用？

分子氧是好氧生物的重要底物和電子傳遞鏈的末端受體，與線粒體功能障礙、糖尿病、腫瘤、心血管疾病、神經性疾病密切相關。因此，了解清楚細胞或組織內部切實的氧氣濃度分布，同時掌握氧的消耗速率，對於我們掌握疾病的發生、尋找治療的靶點和藥物篩查有著至關重要的作用。

由於受技術和認知的限制，在以往的體外線粒體或能量代謝研究中，我們將細胞培養在接近大氣氧濃度（21%）的環境下，忽視了很多細胞在實際機體中處於缺氧環境的事實，忽視了氧氣濃度從大氣到培養體系再到細胞內部的濃度梯度，忽視了不同處理組之間氧濃度的差異（圖1）。

圖1：利用MitoXpress Intra - Intracellular Oxygen Assay檢測不同處理組細胞內絕對氧濃度的變化。在21%大氣氧濃度環境下，未處理組細胞實際的胞內氧濃度只有18%，而FCCP處理組由於代謝增快造成胞內氧濃度只有10%；當把環境氧濃度降至15%時，未處理組胞內氧濃度為11%，FCCP組為3%；當環境氧濃度為6%時，未處理組為3%，FCCP組為0.5%。

隨著研究手段的不斷發展和認知的不斷深入，科研工作者越來越認識到按照傳統培養方法並不能完整且真實的反應機體的現實狀況，因此有了細胞3D培養技術，有了缺氧環境培養，以及今天要著重跟大家分享的探針法胞內氧檢測試劑。

Luxcel公司基於其專利的O2敏感納米探針技術，研發推出了一款專門針對高通量胞內絕對氧濃度和氧消耗速率檢測的產品--MitoXpress Intra-Intracellular Oxygen Assay。

實驗中，帶有熒光基團(Ex/Em: 380nm/650nm)的惰性探針與細胞過夜培養後通過胞吞作用進入細胞，與細胞內的氧分子結合。氧分子的結合會使探針上偶聯的熒光基團淬滅，因此我們可以通過監測熒光信號的動態變化來了解細胞內的絕對氧濃度和氧消耗速率（圖2）。

圖2：MitoXpress Intra - Intracellular Oxygen Assay探針的激發和發射波長分別為380nm和650nm。

MitoXpress Intra - Intracellular Oxygen Assay試劑盒既可以與檢測ATP等參數的試劑盒搭配使用，又由於探針與分子氧的結合是可逆的，因此可以對細胞進行長時間的觀察檢測。若結合Biotek廠家的cytation系列多功能酶標儀，還可以對細胞進行成像，一份樣本同時得到更多的數據，均一性更強。

歡迎索取產品詳細信息。

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