史上最全質粒圖譜及看法，值得收藏！

作者：解螺旋·麥子

導語

每當拿到一個質粒圖譜，第一反應就是一臉懵，這是什麼玩意？這些ori、RBS、tet是什麼鬼？這些箭頭代表什麼，轉錄的方向嗎？為什麼都不相同，不會「撞車」么？這玩意究竟怎麼看啊？

如何看懂質粒圖譜

Step 1:先了解質粒的基本組成元素，Ori複製起始點、抗性基因有哪些、多克隆位點在哪裡，有哪些酶切位點？有哪些熒游標記或蛋白標籤序列？

Step 2:看質粒是否是表達載體，如果是，那就必定有這些原件：啟動子－核糖體結合位點－克隆位點－轉錄終止信號。

Step 3:弄清楚方向。為什麼質粒圖譜上有的箭頭順時針有的箭頭逆時針？那其實是代表兩條 DNA 鏈，即質粒是環狀雙鏈 DNA，它的啟動子等在其中一條鏈上，而它的某些基因在另一條鏈上。當然，最重要的是要弄清楚目的基因插入那一段（從T7啟動子到終止子那一段）的方向，即下圖黃色圈圈所示的箭頭方向，其它的大可以忽略。

質粒盛宴，可打包帶走

pcDNA3.1(-)和pcDNA3.1(+)，構建表達載體常用思密達~

強大的pEGFP質粒家族，構建具有綠色熒光的融合蛋白，麥子的摯愛~

pUC19常用於DNA片段克隆、DNA測序、外源基因表達等

帶DYKDDDDKtag的pCMV-C/N質粒及其多克隆位點

pAAV-IRES-hrGFP腺病毒相關載體

·······

pET質粒系列該系列是大腸桿菌克隆表達重組蛋白很強大的系統，目的基因被克隆到pET質粒載體上，受噬菌體T7強轉錄及翻譯調控，宿主細胞提供的T7RNA聚合酶誘導其表達。

pLVX-IRES-ZsGreen1及其克隆位點，哺乳動物細胞慢病毒表達載體，載體能夠同時表達ZsGreen1熒光蛋白和目的基因

腺病毒穿梭質粒pShuttle系列

pDsRED1-C1: C代表在DsRed1的C段插入序列構建融合蛋白

pDsRED1-C1: C代表在DsRed1的N段插入序列構建融合蛋白

DsRed蛋白單體突變的載體，pDsRED系列載體，屬於熒光蛋白報告載體

pLazl質粒，可以提供lac阻遏蛋白

質粒pLysS&E，具有氯黴素抗性。此質粒含有表達T7 溶菌酶的基因。

pSCREEN-1b(+)質粒，也含有表達T7 溶菌酶的基因

pMAL-p5X:大腸桿菌(E.coli)表達載體，用於蛋白表達與純化

pGEX載體系列，特點就是帶有GST標籤，可以增加目的蛋白的溶解度

p3XFLAG-Myc-CMV質粒，For transient expression and secretion of dual tagged (N-terminal 3XFLAG, C-terminal c-myc) fusion proteins.

即雙重標記瞬時表達和分泌，N端 3XFLAG標記，C端c-myc標記，一看這質粒就知道逼格高、價格較貴~

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