色譜柱之「帖子觀點」pk「個人觀點」！

本文僅代表作者個人觀點

最近一直混跡於極限色譜柱版，看了很多學了很多，在此謝謝版面、版主還有各熱心板友。很多東西，我並不能贊同（也有不明白的）。這個貼子，要一一列出，並表達我的觀點，請大家文明留言。

我是菜鳥，我說的請大家注意鑒別，不要被誤導。

送大家幾句話，是我關於液相的一些體會：

很多東西，其實沒有必要，拿一些極低極低概率的事件來說事。

說是標準，其實是可有可無的標準；說是規程，其實是可輕可重的規程。

大家不要一味盲從，迷信理論，為什麼？

閑來無聊之一：更換色譜柱的時候，需不需要開著流速

某貼子內容：更換色譜柱的時候，不要關閉流速，至少也要開著小流速，以防氣泡進入。

本人觀點：典型的給自己沒事找事，完全沒有必要打開流速。更換色譜柱，也就是幾分鐘的事，在這幾分鐘之內，管道的流動相會幹么？管道的流動相會往泵迴流么？就算是你用手去彈管道，裡面的流動相也未必會被彈出來。

退一萬步講，就算是進了氣泡，也是個極小的氣泡，這在平衡的過程中，很快就可以搞定，也不需要額外增加平衡的時間來處理。所以，你開也行，你關也行，為什麼一定要說成打開流速？照這麼個邏輯，那我還可以說，你開著流速，流動相揮散到空氣中，增加了對環境的污染，你罪過大了！！

閑來無聊之二：液相樣品，用什麼溶解？

某貼子內容：貼子討論用於液相的樣品，該用什麼溶劑溶解

本人觀點：在可能的條件下，建議用流動相溶解。如果流動相溶得不好怎麼辦？沒必要死死地一定用多少多少大體積的流動相去溶，溶解的體積越大，相當於原點越大，對分離度是有一定影響的。

用甲醇溶得好，那就用甲醇溶，盡量用小體積就可以了。別跟我說，不用流動相溶解就不行，會損害色譜柱等等，扯淡。就算是會損害，那也是沒辦法的事。

舉個例子，你的定量閥25微升，你用甲醇，5微升就可以溶解了；你用流動相，30微升才能溶解，請問，你用什麼溶解？你有本事你別選甲醇啊，你不是說會傷害色譜柱嗎？別自己搬石頭砸自己啊，多疼啊，唉喲唉喲。。

閑來無聊之三：管路中使用PEEK管時，哪些流動相不能使用？

某貼子內容：有回貼說，使用強酸強鹼的時候，可能會水解PEEK，所以不能用。

本人觀點：這是個徹頭徹尾的扯淡。在做液相的時候，能使用多強的酸？能使用多強的鹼？強到能水解PEEK管的地步？反問一句：連PEEK管都耐不住這種酸（鹼），你的色譜柱能受得了？你的其它管道系統能受得了？

PEEK管具有耐高溫、機械特性、自潤滑性、耐化學藥品性(耐腐蝕性)、阻燃性、耐剝離性、耐疲勞性、耐輻照性、耐水解性等等特性。PEEK管是相當地「彪悍」，所以，當你覺得要考慮PEEK管是不是承受得了的時候，你應該在這之前，先考慮你的柱子能否受得了、先考慮其它管道系統能否受得了。

閑來無聊之四：PEEK管，應該怎麼切？

某貼子內容：貼子主要討論怎麼切PEEK管

本人觀點：PEEK管，如果切斷，有專門的工具，用專門的工具，可以切得很平整（我用過）。但是，如果沒有專用的工具怎麼辦？一是找人借找廠家，二是自己動手。自己動手用什麼工具？刀片可以，剪刀可以，水果刀可以，甚至菜刀也可以，只要你能切得平整，就可以。條條大路通羅馬，沒人規定必須用專用的工具刀。

只是有一點需要提醒，自己切的時候，要切平整，並不是那麼容易。但是呢，你多練幾次，就差不多了，下刀盡量做到：快、准、狠，基本就差不多了。如果有需要，沒有專用的工具刀，可以來找我，我有一定的經驗。

閑來無聊之五：色譜柱的柱效如何判斷，必須用標準品嗎？

某貼子內容：回貼對此意見不一，有人認為需要，有人認為不需要。

本人觀點：色譜柱的柱效判斷，完全沒有必要用標準品。新買的柱子，經過一些簡單的前處理，可以用一些純的、或者較純的、或者你對其組成比較清楚的樣品進行「柱效檢測」，看看峰形、壓力就差不多了。完全沒有必要按照廠家出廠時的做法，你來重複一遍。

我想請問一下，你按照廠家的做法重新檢測一定的目的是什麼？意義何在？廠家的工作，你來做是么？你覺得你重新驗證一次你會放心一些？如果你是這種心態，你其實還是不信任廠家，那你何必購買人家的色譜柱？另外，你有廠家檢測的那些標準品么？那些標準品，有多少人有？有又怎麼樣，還是浪費時間、精力、人力、物力等等。

排除人為因素，如果是柱子本身質量（柱壓、柱效等等）有問題，廠家一般也會跟你調換，你有什麼可擔心的？

閑來無聊之六：樣品和流動相，到底哪個對柱子污染大？

某貼子內容：提問的形式出現，沒有表達觀點。

本人觀點：我一直堅定不移地認為，樣品對於柱子的污染，是擺在第一位的；我一直堅定不移地認為，相對於樣品，流動相對柱子的污染可以忽略不計。

流動相，一般是可以人為控制的，處理得好的流動相，乾淨的流動相，基本不會污染色譜柱，我從來沒看到有人用流動相跑柱子，把柱子跑壞的；樣品，一般是不可控制的，有些樣品，就算通過前處理，也還是一樣的「臟」，污染在所難免，除非你不分析。

有人說，流動相，加的緩衝鹽啊或者其他一些物質，也有一些「彪悍」的，這是事實，但是這個不是主流，屬於少數情況，少數情況，就得具體情況具體分析了。

閑來無聊之七：不同廠家的色譜柱與保護柱可以混用嗎？

貼子觀點：提問的形式出現。

本人觀點：我認為，是可以混用的。保護柱，顧名思義，就是起的一種保護作用而已，一定程度上來說，它只對樣品起著一個「過濾」的作用。有人說，它對樣品也有一定的分離度，是的，這是事實。但是，那個人認為，相對於本柱來說，保護柱的這點分離效果，基本可以忽略。如果實在不放心，覺得不按配套使用不妥當，那就別用保護柱，直接用本柱做算了。當然，這個方法，過於大膽，不宜長期如此，一針兩針也就算了。

閑來無聊之八：同一台液相，不同的人使用，色譜柱如何管理？

貼子內容：提問的形式出現。

本人觀點：這個問題簡單，作好實驗記錄就行。實驗記錄，應該包含的內容有：沖柱的壓力（含流速、沖柱溶劑）、峰形記錄（如果是公用柱子的話）、使用人、含日期、證人（不是特別重要，關係複雜的實驗室除外）。有了這幾條，基本上就不能出現問題了，至於使用的流動相是什麼、使用過程中的壓力如何波動等等，這些沒有必要。

實驗記錄，要的是最後的記錄結果，過程在這裡顯得並不重要。這個記錄，也就是幾分鐘的事，幾分鐘省掉很多不必要的麻煩（如交接出現問題，相互推託責任）。另外，在我們這裡，如果不作記錄，或者記錄不完整，停止使用液相一次，多次出現同類問題，終身不得使用液相。

閑來無聊之九：流動相含有緩衝鹽，如何清洗色譜柱？

貼子觀點：不僅僅是某一個貼子，很多貼子都提到，什麼用水或者低濃度甲醇/水，沖洗半小時，一小時甚至很多個小時，然後用甲醇沖洗多久多久。

本人觀點：以上觀點，純屬扯淡。第一點，流動相中含有緩衝鹽，多久沖洗一次？如果你是連續用，你就可以一直用，不必沖洗，一直用到你不用為止，然後沖洗（前提：壓力正常、流動相前處理正確）。

第二點，怎麼沖洗？流動相中含有緩衝鹽，沒有必要一定用多少多少低濃度的甲醇/水沖洗。比如，你原來是40%甲醇/水，你用不大於40%的不含緩衝鹽的流動相衝洗就行了，為什麼？比40%大，水相減少，有機相增多，緩衝鹽可能析出損害柱子。

第三點，一次沖洗多長時間？十幾分鐘已經足夠了，緩衝鹽，在柱子里根本就不保留，不保留的東西，你為什麼要衝半小時？純粹地浪費時間。最後，用甲醇沖柱就可以了，搞定。

閑來無聊之十：用什麼數據指標來衡量色譜柱的壽命？

貼子觀點：部分人提到，用進針數來衡量。

本人觀點：衡量色譜柱的壽命，最通俗地說法就是：實驗要求。當做出的數據滿足不了你的實驗要求了，你得不到應該得到的結果了，對於你這個實驗來說，它已經壽終正寢。

稍微理性化一點的說法就是：壓力高了，柱效低了（包括峰形差了等方面），這個時候，可以經過一些處理（如再生），對行進行「挽救」，有可能繼續使用，使它繼續為你服務。

用進針數來衡量，我不敢說這一定就是錯的，但這種說法，絕對是欠考慮的，是有失妥當的。同類型的樣品，用進針數來衡量，還勉強說得過去；如果是不同類型的樣品（比如一個血液樣品、一個化學葯），差異太大，根本沒有任何可以參考的意義。

閑來無聊之十一：柱子的最大流速是多少？

貼子內容：提問的形式出現

本人觀點：不同的柱子，有不同的流速限制。普通的C18分析柱，一般最大也就是用1ml/min，0.8ml/min也用得比較多，大了就有可能把柱子沖壞了（其實我很大膽地認為，大點也是沒事的，呵呵）。

我們實驗室有根手性柱（分析型），師兄做的時候，流速就用0.5ml/min，我問為什麼這麼低的流速，師兄說，說明書就這麼寫的。由於本人沒有親眼所見，故此處只是一提，不作定論。

半製備、製備型的柱子，流速可以更大，比如4ml/min、8ml/min、10ml/min，這些都比較常見。更大一點的，30ml/min不算大流速，呵呵。我們學校有個實驗室有台製備，可達100ml/min（平時也就是20ml/min，因為太費流動相）。工業生產的，那就更大了，此處不討論。

另外，至於貼子中提到的泵能否承受的問題，一般不用考慮，這種情況很少見過。除非，你把製備柱接在分析液相上，這時候，你就得考慮泵能否耐受了，呵呵。

閑來無聊之十二：色譜柱受到機械衝擊或摔落，會如何？

貼子觀點：有人回貼提問，受到多大的衝擊，會使柱效發生變化呢？

王子衿觀點：現在的電腦硬碟不知道是不是保護措施好了一點，在以前，你點背的時候，一次停電就有可能掛掉你真在進行格式化的硬碟；點正的時候，硬碟掉到地上撿起來也照樣用。

所以說，這個是概率問題，人摔一跤可能會殘廢，也可能沒事爬起來繼續跑。為了驗證殘廢的幾率，我們要多摔幾次看看么？要不要換不同的姿勢看看是不是一樣的效果和幾率？

本人觀點：對王子衿的觀點深表贊同。這個跟測試汽車安全性能不是一回事，如果要跟汽車測試關聯的話，我覺得測試色譜柱的耐摔性，跟測試用石頭砸汽車，考察汽車的耐砸性，這才是相似的道理。

閑來無聊之十三：流動相走干後，如何最大程度挽救色譜柱？

貼子觀點：提問的形式出現，討論如何挽救色譜柱。

本人觀點：流動相不夠，液相跑空柱，這個，對色譜柱是沒有損害的，大家可以放心。液相的泵，輸送的是液相（流動相），它並不能輸送氣體，所以，當幹了的時候，柱子是柱子，泵是泵，它們不再有多大的關係。如果一定要說他們有聯繫，那就是：它們僅僅是連接的。

那對泵有沒有損害呢？答案是肯定的。但是，這種損害到底有多強呢？一般而言，不是長期如此，不是長時間如此，影響不大，排排氣泡，繼續實驗，不必放心上。如果哪台泵因為幹了一次兩次而出現問題了，那我只能說，你的泵質量也太次了，直接讓它退休吧，不虧。

閑來無聊之十四：色譜柱兩端的填料是一樣的嗎？

貼子觀點：兩端填料不一樣，反衝有可能將填料衝出。

本人觀點：說這種話的，可真會扯淡，高！！據我所知，柱子的裝填，一般採用勻漿等密度，在高壓下裝填，請問一下，在這種條件下，怎麼使兩端填料不一樣？

行，你可以說，我不懂裝填，是的，我承認我不懂裝填。但是，我另外請問一下，柱子兩端填料不一樣的目的是什麼？跟整個柱子填料一樣，這種特殊真的有什麼特殊的意義么？

照這種說法，我也造一個說法吧：不光是柱頭尾填料不一樣，整個色譜柱，從柱頭到柱尾，所用的填料都不一樣，顆粒由大到小（或者由小到大，或者時大時小），為什麼？就是為了顯示我裝柱技術的高超，這就是特殊意義。

不要反問我，要是反問我，我會採用哲學的說法：世界上沒有任何兩顆粒徑完全相同的填料

閑來無聊之十五：反衝色譜柱，需不需要接檢測器？會不會污染？

貼子觀點：不能接檢測器，會污染檢測器。

本人觀點：接不接檢測器，完全由個人興趣愛好決定，可接也可不接。至於接上檢測器會被污染，這是地地道道地扯淡。請問一下，是怎麼個污染法？從柱子中沖洗出來的髒東西，會在檢測器停留？會被吸附在檢測器壁上？

這些髒東西，連色譜柱對它的束縛都能擺脫，連色譜柱對它的作用力都能克服，最後，它居然在對它沒有任何作用力的檢測器死吸附了，這是哪門子道理？你該不會說：他對檢測器情有獨鍾吧？那我只能說：你對扯淡情有獨鍾，呵呵。

我個人更傾向於接上檢測器，這樣的話，能不能將一些髒東西沖洗出來，可以從檢測器上更直觀地看到，一目了然。

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